PCR法の3段階

PCR 法の3つの段階（熱変性・アニーリング・伸長）がそれぞれ何をしているかを問う問題です。

DNA の2本鎖は，塩基どうしの水素結合でくっついています。

熱でほどき，冷やしてプライマーをつけ，ポリメラーゼで伸ばす，をくり返して DNA を倍々に増やします。

①：温度を下げすぎると，少しちがう配列にもプライマーがつきます（非特異的）。上げすぎるとつきにくくなるので，逆です

②：長い配列ほどコピーに時間がかかるので，伸長時間は長くします。逆です

③：新しい鎖はプライマーの先から伸ばすので，増えた DNA の両端にはプライマーの配列が入っています

④：高温を何度も通るので，耐熱性の高いポリメラーゼ（Taq など）が要ります

⑤：熱変性は，加熱で水素結合を切って1本鎖にほどく段階です。正しいです。答えは ⑤

①（温度を上げすぎ）：アニーリング温度は「高いほど厳密，低いほどゆるい」です。向きを逆にしたひっかけです。

• PCR＝熱変性（約95℃，水素結合を切る）→アニーリング（約55℃，プライマーをつける）→伸長（約72℃，ポリメラーゼが伸ばす）のくり返し
• 1サイクルごとに DNA は約2倍。高温に耐える Taq ポリメラーゼが鍵
• アニーリング温度は，低すぎると非特異的，高すぎるとつかない