PCR法の3段階

PCR 法の3つの段階（熱変性・アニーリング・伸長）のしくみについて，正しい記述を選ぶ問題です。

PCR は約 95℃ で2本鎖をほどき，約 55〜65℃ でプライマーをつけ，約 72℃ で酵素がのばす，をくり返します。

毎回 95℃ 近くまで加熱するので，熱で壊れない酵素が要ります。

①：2本の鎖をつないでいるのは水素結合で，共有結合ではありません。

②：非特異的なアニーリングが起きやすいのは温度を下げすぎた時です。上げすぎると，くっつきにくくなります。

③：長い配列ほどコピーに時間がかかるので，伸長時間は長くします。

④：高温のサイクルに耐える酵素（好熱菌由来の Taq ポリメラーゼなど）が PCR に向いています。正しい記述です。

⑤：プライマーは増やした DNA の両端にそのまま取りこまれるので，その配列はふくまれます。答えは ④

②（温度を上げすぎ）：「上げすぎ」と「下げすぎ」を入れかえたひっかけです。温度が低いほど，似た場所にもゆるくくっつきます。

• PCR：熱変性（約 95℃）→アニーリング（約 55〜65℃）→伸長（約 72℃）のくり返し。1回で DNA が理想的には2倍
• 2本鎖 DNA をつなぐのは塩基どうしの水素結合。熱でほどける
• 耐熱性 DNA ポリメラーゼ（Taq）を使うので，毎回酵素を足さなくてよい